sds电泳应用? 聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点
网上有很多关于sds电泳应用?的知识,也有很多人为大家解答关于聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点的问题,今天小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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一、sds电泳应用?
二、聚丙烯酰胺凝胶的电泳
一、sds电泳应用?
SDS-PAGE又称SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,其作用如下:
SDS PAGE可以试图将电泳中的蛋白质电荷差异消除或降低到可以忽略的水平,因此它经常被用于鉴定蛋白质分离样品的纯度。S
DS用于检测纯化过程中的纯度。纯化后的蛋白质在SDS电泳中通常只有一条条带,但如果蛋白质由不同的亚基组成,则可能在电泳中形成对应于每个亚基的几条条带。
SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳灵敏度高,一般要求蛋白小于微克。而且通过电泳可以同时获得分子量,这对了解未知蛋白质和设计纯化工艺非常重要。
扩展数据:SDS-PAGE的特性;
1、在一定浓度下,凝胶透明,有弹性,具有良好的力学性能;
2、化学性质稳定,不与被分离物质发生化学反应,不溶于多种溶剂;
3、对pH和温度变化稳定;
4、几乎没有吸附和电渗。只要Acr纯度高,操作条件一致,样品分离重复性好。
5、样品不易扩散,用量少,其灵敏度可达10-6 ug;
6、凝胶的孔径可以调节,根据被分离物质的分子量选择合适的浓度,通过改变单体和交联剂的浓度可以调节凝胶的孔径;
7、分辨率高,尤其在不连续凝胶电泳中,集浓度、分子筛、电荷效应于一体。因此,它比醋酸纤维素薄膜电泳和琼脂糖电泳具有更高的分辨率。
二、聚丙烯酰胺凝胶的电泳
聚丙烯酰胺凝胶电泳;聚丙烯酰胺凝胶电泳;以聚丙烯酰胺为支持基质的PAGE电泳程序。一般来说,聚丙烯酰胺凝胶电泳有两种类型。单向电泳:采用全蛋白或十二烷基磺酸钠(SDS)处理过的蛋白进行单向电泳,在有凝胶的平板上进行平行分离(玻璃管中使用的圆柱棒凝胶过去也用于电泳,现在很少使用)。双向电泳:先用天然蛋白分离样品,再用SDS处理凝胶板,样品进行第二方向分离。第一次分离了各种蛋白质,于是蛋白质亚基在第二个方向上被分离。主要优点是:(1)合成高分子,所以重复性好;良好的分离能力;凝胶的孔径可以通过增加或减少丙烯酰胺单体和交联剂(N,N,N’-亚甲基双丙烯酰胺)的浓度来调节;操作简单,时间短;5]化学性质稳定,机械性能和柔软性好;[6]电泳可在酸性和碱性缓冲液中进行,等电点电泳可加入两性电解质,含电解质表面活性剂(SDS)或非电解质表面活性剂(Np40,Tritonx-100等)的凝胶。)可用于电泳,双向电泳也可与它们结合等。应用范围广,使用价值越来越大;(7)由于染色技术的进步,可以定量和检测微小斑点(琼脂糖电泳)。
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